山核桃AFLP实验技术体系的建立

• 作者: 张秋月 曾燕如 池伟 王丽 赵鑫珠 郭金剑
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 植物学 山核桃 DNA提取 扩增片段长度多态性(AFLP)
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 532-537
• 页数: 6页
• 分类号: S718.46
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0756.2008.04.025

摘要

以充分展开的山核桃Carya cathayensis嫩叶为材料,利用改良CTAB(十六烷基三甲基溴化铵)法与CTAB裂解-硅珠吸附法提取山核桃总DNA,对适合于山核桃叶片的AFLP(扩增片段长度多态性)分析体系进行了摸索.结果表明:①改良CTAB法适用于从山核桃叶中提取高质量的DNA,提取的DNA可用于AFLP的分析;②采用EcoR I/Mse I酶切组合,酶切连接一步法与两步法的效果没有明显的差异,但一步法操作更为简便;③适合于山核桃叶AFLP分析的引物组合为E-ACT+M-CAT,E-ACT+M-CTG,E-ACG+M-CAT,E-ACG+M-CTG.扩增产物经60 g·L-1变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后进行银染,条带信号强度一致性好,条带分布均匀、清晰,分辨率较高.图6表3参17