抗人Lipocalin型前列腺素D合酶单链抗体基因的构建与表达

• 作者: 宛传丹 朱国华 许晓风 陈德宇 黄宇烽
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: Lipocalin型前列腺素D合酶 单链抗体 构建 表达
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 182-186
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 字数: 4609字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-2478.2005.03.002

摘要

利用RT-PCR技术,从稳定分泌抗人Lipocalin型前列腺素D合酶(Lipocalin-type prostaglandin D synthase,L-PGDS)单克隆抗体的鼠杂交瘤细胞中获得抗体可变区基因;通过一柔性连接短肽[(Gly)4Ser]3,SOE PCR法将此重、轻链可变区拼接成完整的抗人L-PGDS单链抗体基因,并装入表达载体pET-28a(+),在BL21宿主菌中进行表达.经SDS-PAGE检测显示,在低剂量0.02 mmol/LIPTG诱导和较低温度25℃或28℃条件下培养,重组菌表达了一定量的可溶性单链抗体.后经Ni-NTA亲和层析柱纯化,得率为2 mg/100ml,纯度达92%;双夹心ELISA和免疫荧光竞争抑制实验证实,纯化后的单链抗体具有较好的亲和力和特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许晓风	南京师范大学生命科学学院	54	399	12.0	17.0
2	宛传丹	南京军区南京总医院生殖遗传室	6	22	3.0	4.0
3	黄宇烽	南京军区南京总医院生殖遗传室	254	2755	26.0	39.0
4	朱国华	南京军区南京总医院生殖遗传室	5	11	2.0	3.0
8	陈德宇	南京军区南京总医院生殖遗传室	8	45	4.0	6.0