乙型肝炎病毒前-X在大肠杆菌中的表达和纯化

• 作者: 张黎颖 成军 李蕴茹 王春花 郎振为 闫杰
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2005,（13）
• 所属期刊栏目: 研究快报
• 页码范围: 1612-1614
• 页数: 3页
• 分类号: R5
• 字数: 4553字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2005.13.031

摘要

目的:在大肠杆菌中表达乙型肝炎病毒(HBV)前-X蛋白,并进行纯化和鉴定.方法:通过聚合酶链式反应(PCR)获得HBV前-X基因,将前-X克隆至PET32a+,构建原核表达重组质粒,在大肠杆菌中诱导表达,表达产物进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE),考马斯亮蓝染色.采用凝胶电泳回收纯化.经Western blot.结果:成功扩增获得HBV的前-X编码基因片断,并构建大肠杆菌表达载体.表达载体转化的大肠杆菌经过IPTG的诱导,裂解,SDS-PAGE,结果显示得到了目的蛋白Mr27000.以抗-His的单克隆抗体进行的western blot杂交实验,结果表明表达、纯化的目的蛋白具有特异性免疫反应识别.结论:成功表达HBV的前-X蛋白,对于研究HBV的前-X蛋白的免疫原性和生物学特性奠定了坚实的基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	成军	北京地坛医院传染病研究所	210	843	13.0	20.0
2	张黎颖	北京地坛医院传染病研究所	34	100	5.0	8.0
3	郎振为	北京地坛医院病理科	38	160	8.0	11.0
4	闫杰	北京地坛医院传染病研究所	47	325	10.0	17.0
5	王春花	北京地坛医院传染病研究所	3	4	1.0	2.0
6	李蕴茹	北京地坛医院传染病研究所	4	14	2.0	3.0