靶向Survivin基因的短发卡RNA在体内对U251细胞移植瘤的影响

• 作者: 付洛安 宋蕾 师长宏 杨彤涛 王西玲 甄海宁 章翔 章薇 胡世颉 高大宽
• 来源期刊: 中国神经肿瘤杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Survivin 短发卡RNA RNA干涉 胶质瘤
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 237-242
• 页数: 6页
• 分类号: R739.41
• 语种: 中文

摘要

背景与目的:Survivin基因属于凋亡蛋白抑制因子(inhibitor of apoptosis,IAP)家族,具有抗细胞凋亡、促细胞增殖和促血管形成等多种生物学活性,其在脑胶质瘤发生和发展过程中的作用尚不完全明确.本研究旨在观察稳定转染靶向Survivin基因的特异性短发卡RNA(shRNA)真核表达载体对人脑胶质母细胞瘤U251细胞裸鼠体内肿瘤生长和血管形成的影响.方法:将U251细胞,稳定转染Survivin基因shRNA真核表达载体pWH1-SR的U251-SR细胞,以及稳定转染空载体pWH1的U251-P细胞,分别接种于裸鼠背部皮下,建立人脑胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型.定期观察肿瘤生长情况,测定肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线,观察45天后处死动物,称瘤重.采用免疫组化SABC法检测Surwivin、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)以及八因子相关抗原(factor Ⅷ related antigen,FⅧRag)在各组肿瘤标本中的表达,采用TUNEL法检测凋亡细胞,分别计算各组肿瘤标本的增殖指数(proliferative index,PI)、凋亡指数(apoptotic index,AI)以及微血管密度(microvessel density,MVD).结果:与U251、U251-P组裸鼠相比,U251-SR组裸鼠肿瘤形成时间延迟,肿瘤生长缓慢,肿瘤体积及瘤重均明显减小(P＜0.01);U251-SR组肿瘤标本Survivin蛋白表达明显下调;PI和MVD明显减少,AI明显升高(P＜0.01).结论:靶向Survivin基因的shRNA能够在体内明显抑制U251细胞的肿瘤生长和血管形成,Survivin基因可作为脑胶质瘤基因治疗的一个良好靶点,而RNA干涉(RNA interference,RNAi)技术可为脑胶质瘤的基因治疗提供新的重要手段.