人多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶2基因反义RNA表达质粒的构建及克隆鉴定

• 作者: 刘可人 吴士良 周嘉梁 潘浩 郭向红 金美芳
• 来源期刊: 江苏大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 多肽:N-乙酰氨基半乳糖转移酶 O-糖基化 GC7901细胞 RT-PCR pEGFP-C1质粒
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 100-103,106
• 页数: 5页
• 分类号: R34
• 字数: 3298字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-7783.2005.02.003

摘要

目的:研究反义封闭ppGalNAc-T2基因表达对胃癌细胞GC7901细胞增殖以及肿瘤细胞生物学行为的影响,构建反义表达载体并转染胃癌细胞GC7901.方法:在对几种肿瘤细胞的ppGalNAc-T2基因的表达水平分析后,以高表达ppGalNAc-T2的人胃癌细胞GC7901的总RNA为模板,利用RT-PCR方法扩增两段不同长度ppGalNAc-T2基因片段,构建反义表达载体并转染胃癌细胞GC7901,通过G418筛选,建立一系列旨在封闭胃癌细胞GC7901细胞pp-GalNAc-T2基因表达的亚细胞克隆.通过荧光显微镜、RT-PCR技术手段检测封闭反义ppGalNAc-T2基因RNA表达.结果:ppGalNAc-T2反义表达质粒载体pEGFP-FDT2和pEGFP-FXT2经限制性酶切及部分序列分析证明基因已正确插入载体中,荧光显微镜及RT-PCR显示转染成功.结论:成功构建了ppGalNAc-T2反义表达质粒载体,反义封闭pp-GalNAc-T2基因表达后,胃癌细胞GC7901ppGalNAc-T2的含量明显降低,为进一步研究ppGalNAc-T2奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴士良	苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室	95	458	11.0	17.0
2	周嘉梁	苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室	8	39	3.0	6.0
3	潘浩	苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室	17	50	4.0	6.0
4	金美芳	苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室	27	99	5.0	8.0
5	郭向红	苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室	6	21	3.0	4.0
6	刘可人	苏州大学医学院生物化学与分子生物学教研室	1	3	1.0	1.0