广西巴马小型猪α-1,3半乳糖转移酶基因真核表达载体的构建及鉴定

• 作者: 兰干球 蒋钦杨 郭亚芬 郭晓萍 陈时锦
• 来源期刊: 实验动物与比较医学
• 学科: 医学
• 关键词: 广西巴马小型猪 α-1,3半乳糖转移酶 真核表达载体 表达鉴定
• 年，卷（期）: 2012,（1）
• 所属期刊栏目: 第11届中南地区实验动物科技交流会优秀论文选刊
• 页码范围: 1-7
• 分类号: R332|Q95-33
• 字数: 3712字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-5817.2012.01.001

摘要

目的 通过RT-PCR扩增巴马小型猪GGTA1基因,分析其序列的结构特点并构建真核表达载体,为生产GGTA1基因沉默的广西巴马小型猪奠定基础.方法 根据NCBI上发布的猪α-1,3半乳糖转移酶基因cDNA序列(AF221508),设计合成一对含有 HindⅢ和BamHI酶切位点的特异性引物,以广西巴马小型猪肝脏组织总 RNA为模板进行RT-PCR,所得目的片段经纯化、克隆、鉴定和测序;将目的基因与pEGFP-N 1进行双酶切后连接构建真核表达载体pEGFP-GGTA1,通过测序,双酶切鉴定.结果 所克隆的广西巴马小型猪GGTA1基因存在缺失第五外显子(81-116) 的GGTA1序列,序列全长1 080 bp和未缺失第五外显子的GGTA1序列,全序列为1 116 bp.构建两个表达载体(缺失第五外显子 pEGFP-GGTA1-1、未缺失第五外显子pEGFP-GGTA1-2).结论 广西巴马小型猪GGTA1基因存在第五外显子缺失的现象,通过对GGTA1基因克隆序列进行分析以及构建两个真核表达载体,为后面在猪源PK-15细胞中对其进行表达鉴定以及巴马小型猪 α-1,3半乳糖转移酶基因的沉默实验奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋钦杨	广西大学动物科学技术学院	97	256	8.0	12.0
2	兰干球	广西大学动物科学技术学院	92	263	7.0	12.0
3	郭亚芬	广西大学动物科学技术学院	113	570	9.0	20.0
4	郭晓萍	广西大学动物科学技术学院	13	11	2.0	3.0
5	陈时锦	广西大学动物科学技术学院	7	5	2.0	2.0