hVEGF165基因克隆及其在COS-7细胞中的表达

• 作者: 周正春 张胜权 徐从贞 汪思应 罗欣 葛建军 陈兵
• 来源期刊: 中国胸心血管外科临床杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 血管内皮生长因子 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究论著
• 页码范围: 185-188
• 页数: 4页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2892字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-4848.2005.03.011

摘要

目的克隆人血管内皮生长因子(hVEGF)基因VEGF165片段,构建pcDNA3.1/hVEGF165,观察其在COS-7细胞中的表达,为基因治疗缺血性心脏病的研究奠定基础. 方法从合法引产的胎儿心肌组织中提取总核糖核酸(RNA),应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法获得hVEGF165基因,将其重组入T载体,聚合酶链反应(PCR)法鉴定并测序,双酶切后克隆入真核表达载体pcDNA3.1/myc-his-B中,构建pcDNA3.1/hVEGF165重组体.用脂质体介导将其转染COS-7细胞,蛋白印迹(Western blotting)法检测rhVEGF165的表达蛋白. 结果用RT-PCR方法从胎儿心肌组织中获得了正确的hVEGF165基因序列,并成功构建pcDNA3.1/hVEGF165,且实现转染COS-7细胞的瞬时表达. 结论构建的pcDNA3.1/hVEGF165 转染真核细胞COS-7能够表达rhVEGF蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛建军	安徽医科大学第一附属医院心血管外科	93	352	9.0	14.0
2	周正春	安徽医科大学第一附属医院心血管外科	17	76	5.0	8.0
3	罗欣	安徽医科大学生物化学分子生物学教研室	41	130	6.0	8.0
4	汪思应	安徽医科大学病理生理学教研室	131	558	11.0	15.0
5	张胜权	安徽医科大学生物化学分子生物学教研室	64	295	8.0	14.0
6	陈兵	安徽医科大学生物化学分子生物学教研室	28	94	5.0	7.0
7	徐从贞	安徽医科大学生物化学分子生物学教研室	15	74	4.0	7.0