人IL-24基因的克隆及在COS-7细胞中的表达

• 作者: 杨吉成 白艳艳 盛伟华 缪竞诚 谢宇锋 陈雄艳
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人IL-24 克隆 表达 COS-7细胞 凋亡
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 672-676
• 页数: 5页
• 分类号: R392.13
• 字数: 4464字
• 语种: 中文

摘要

目的:克隆人IL-24基因,构建真核表达载体,在COS-7细胞中进行表达,并检测重组表达蛋白hIL-24的抗肿瘤活性.方法:分离人外周血单个核细胞,提取细胞总RNA,采用RT-PCR技术克隆人IL-24基因,将其重组于pUC19,双脱氧末端终止法测定其核苷酸序列,构建真核重组表达载体pcDNA3-hIL-24,进行双酶切和PCR鉴定,以质粒pcDNA3-hIL-24转染COS-7细胞进行瞬时表达,用RT-PCR检测mRNA表达,并用MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测其诱导肿瘤细胞凋亡的活性.结果:成功获得621 bp的人IL-24基因,测序正确,经双酶切和PCR鉴定真核表达质粒构建正确,以脂质体转染COS-7细胞后,用RT-PCR法、MTT法、TUNEL法和流式细胞术检测表明COS-7细胞可表达hIL-24,且所表达的人IL-24具有较强的诱导A549肺腺癌细胞凋亡的作用.结论:人IL-24基因的瞬时表达和凋亡效应的初步研究已获成功,为研究人IL-24抗肿瘤的分子机制和临床应用提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	缪竞诚	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	95	511	13.0	17.0
2	杨吉成	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	164	943	16.0	20.0
3	盛伟华	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	129	700	15.0	18.0
4	谢宇锋	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	51	324	11.0	15.0
5	白艳艳	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	10	61	4.0	7.0
6	陈雄艳	苏州大学医学院细胞和分子生物学教研室	5	59	3.0	5.0