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摘要:
目的:构建人β-防御素3(hBD3)的真核表达载体,建立稳定表达hBD3的细胞株.方法:用EcoRⅠ酶切含有hBD3全长基因的pGEM-hBD3重组质粒,获得其编码区全长序列,将其连接入EcoRⅠ预处理过的pcDNA3中,转化大肠杆菌,酶切鉴定筛选出插入方向正确的转化子.采用脂质体转染法将重组pcDNA3-hBD3真核表达载体导入COS-7细胞, 用G418进行抗性筛选,用RT-PCR和Western印迹检测目的基因hBD3的mRNA和蛋白表达水平.结果与结论:构建的pcDNA3-hBD3真核表达载体转染COS-7细胞后可稳定表达hBD3的mRNA和蛋白,且蛋白主要以分泌形式存在于培养上清中.
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文献信息
篇名 人β-防御素3基因在COS-7细胞中的表达
来源期刊 军事医学科学院院刊 学科 生物学
关键词 人β-防御素3 真核表达 基因转染 真核细胞
年,卷(期) 2004,(4) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 344-346
页数 3页 分类号 Q78
字数 2758字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1674-9960.2004.04.013
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 柴家科 解放军第304医院烧伤科 50 554 16.0 20.0
2 盛志勇 解放军第304医院烧伤科 161 3986 31.0 55.0
3 陈璧 第四军医大学西京医院烧伤科 140 1092 16.0 24.0
4 徐明达 第四军医大学西京医院烧伤科 55 368 11.0 14.0
5 庹晓晔 解放军第304医院烧伤科 3 21 2.0 3.0
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人β-防御素3
真核表达
基因转染
真核细胞
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军事医学
月刊
1674-9960
11-5950/R
大16开
北京太平路27号
82-757
1956
chi
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总下载数(次)
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总被引数(次)
15987
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