S100A13基因真核表达载体的构建及其在 COS-7细胞中的表达

• 作者: 刘江华 文格波 文芳 曹仁贤 杨靖
• 来源期刊: 肿瘤防治研究
• 学科: 医学
• 关键词: S100A13基因 真核表达载体 转染
• 年，卷（期）: 2007,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 576-578,643
• 页数: 4页
• 分类号: R736.1
• 字数: 2703字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3971/j.issn.1000-8578.2007.08.008

摘要

目的 构建以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组表达质粒pcDNA3.1/NT-GFP-S100A13,观察S100A13基因在COS-7细胞中的表达及定位.方法 采用克隆和亚克隆技术构建S100A13基因真核表达载体,脂质体介导转染COS-7细胞,RT-PCR和western-blot验证其mRNA和蛋白的表达,荧光显微镜观察该基因亚细胞定位.结果 酶切和测序结果证实重组质粒含有S100A13编码区序列且插入方向正确,转染后观察该基因亚细胞定位于全胞浆. 结论 成功构建了S100A13基因真核表达载体,该基因在COS-7细胞中成功表达,S100A13基因表达定位于全胞浆.