人FL基因高效真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达

• 作者: 李梁 王冠军 裴雪涛 马俐君
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: FL 真核表达载体 COS-7细胞
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 305-308
• 页数: 4页
• 分类号: R392.12
• 字数: 3213字
• 语种: 中文

摘要

目的：构建人FL真核表达载体-pIRES1neo/hFL，观察其在COS-7细胞中的表达。方法：采用RT-PCR方法自人白血病细胞系TF-1中克隆可溶型FL(Flt3-ligand)cDNA片段，测序鉴定正确后，插入真核表达载体-pIRES1 neo中的EcoR I和BamHI位点，构建hFL真核表达载体-pIRES1neo/hFL。脂质体介导法将其转染COS-7细胞，72h以RT-PCR检测转染细胞中外源hFL基因的转录、ELISA法及脐血CD34+细胞增殖实验测定转染细胞上清中hFL的含量和活性。结果：酶切鉴定表明成功构建了重组真核表达载体-pIRES1neo/hFL；外源hFL基因能在转染细胞中有效转录；ELISA法测得72 h后培养上清中的hFL含量为每24小时251 ng/106 cells，并且分泌的hFL具有良好的生物学活性。结论：构建hFL真核表达载体在COS-7细胞中具有良好的表达活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王冠军	白求恩医科大学第一临床医学院血液肿瘤科	8	91	5.0	8.0
2	马俐君	白求恩医科大学第一临床医学院血液肿瘤科	3	31	2.0	3.0
3	裴雪涛	北京军事医学科学院输血研究所	2	15	2.0	2.0
4	李梁	北京军事医学科学院输血研究所	1	6	1.0	1.0