犬黑皮质素受体4真核表达载体的构建及在COS-7细胞中的表达

• 作者: 佟伟 巴彩凤 张轶博 李会 聂茹 苏荣健
• 来源期刊: 安徽农业科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 犬 黑皮质素受体4 pcDNA3.1(+)质粒 真核表达载体 COS-7细胞
• 年，卷（期）: 2007,（33）
• 所属期刊栏目: 农业生物技术
• 页码范围: 10608-10610
• 页数: 3页
• 分类号: Q503.1
• 字数: 3980字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0517-6611.2007.33.029

摘要

[目的]构建犬黑皮质素受体4真核表达载体并在COS-7细胞中进行瞬间表达.[方法]以犬MC4R线性DNA为模板,进行引物设计,PCR特异性扩增,扩增产物连接到pMD18-T载体上,酶切鉴定后测序.将该片段亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+).重组体pcDNA3.1(+)-MC4R经过酶切和测序鉴定.采用FuGENE HD介导转染技术将pcDNA3.1(+)-MC4R导入COS-7细胞,提取细胞内总RNA,RT-PCR扩增犬MC4R基因的全长cDNA编码序列.[结果]克隆犬MC4R基因的全长cDNA序列,并以pcDNA3.1(+)表达载体为骨架,构建真核表达载体,测序的扩增片段与GenBank公布的模板序列经Blast比对相似性为99%.采用G418筛选,获得带有pcDNA3.1(+)-MC4R的COS-7细胞.[结论]成功构建犬真核表达载体pcDNA3.1(+)-MC4R,重组体能在真核细胞中表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	巴彩凤	辽宁医学院实验动物中心	91	369	10.0	14.0
2	苏荣健	辽宁医学院省高校分子细胞生物学与新药开发重点实验室	34	159	8.0	11.0
3	张轶博	辽宁医学院免疫与病原生物学教研室	18	62	4.0	6.0
4	佟伟	辽宁医学院免疫与病原生物学教研室	25	71	5.0	7.0
5	李会	辽宁医学院免疫与病原生物学教研室	11	30	3.0	4.0
6	聂茹	辽宁医学院实验动物中心	6	78	5.0	6.0