日本血吸虫精氨酸酶基因启动子序列的扩增及序列分析

• 作者: 余新炳 吴忠道 李孜
• 来源期刊: 热带医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 大陆株 精氨酸酶 启动子序列 序列分析
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1-4,40
• 页数: 5页
• 分类号: R383.24
• 字数: 3815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1672-3619.2005.01.001

摘要

目的获取日本血吸虫(Sj)精氨酸酶(ARG)新基因的DNA编码序列及其启动子序列,实验验证ARG基因编码序列的完整性.方法 以日本血吸虫成虫 DNA做模板,PCR扩增 ARG基因编码区的DNA序列并测序;根据Sj ARG基因已扩增的 DNA序列设计2条巢式引物,用TaKaRa LA Taq PCR Cloning in vitro Kit,扩增 Sj ARG基因的启动子序列;对已扩增得到的序列进行 TATA盒的寻找以分析启动子序列的位置,实验验证我们曾获取的 Sj ARG新基因编码序列的完整性. 结果 扩增得到长约 1 000bp ARG基因 DNA序列 , Sj ARG基因 DNA序列内没有内含子,与 cDNA序列完全一致.对启动子序列扩增后,得到一略大于 250bp的序列,测序后分析发现其中有 36bp与 ARG基因 DNA序列的 5′端重叠.因此 ,将精氨酸酶基因的 DNA序列又向前延伸了 221bp,与前面得到的序列拼接后得到一条 1 486bp的总序列,将该序列在 NCBI上进行 ORF的寻找发现其最长的 ORF达 1 164bp,起始密码子在第 156位,终止密码子在第 1 319位 ,该起始密码子前 32位为 TATA盒的位置.因此,确定该 Sj ARG基因全长 cDNA编码序列长应为 1 164bp.结论 成功扩增获得了日本血吸虫精氨酸酶基因编码区的 DNA序列,其不含有内含子;并扩增得到了该基因的启动子序列,从而获得了 Sj ARG基因真正的全长 cDNA序列,为进一步的功能鉴定奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余新炳	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	201	1352	17.0	28.0
2	吴忠道	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	171	835	14.0	21.0
3	李孜	中山大学基础医学院寄生虫学教研室	24	71	4.0	6.0