血管紧张素Ⅱ2型受体基因可调控表达对体外培养血管平滑肌细胞中P21表达的影响

• 作者: 何国祥 冉擘力 刘建平 景涛 王海东 王耿
• 来源期刊: 中国临床康复
• 学科: 医学
• 关键词: 血管紧张素Ⅱ 受体,血管紧张素 肌,平滑,血管 细胞周期 四环素 基因
• 年，卷（期）: 2005,（7）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 42-44
• 页数: 4页
• 分类号: R542.2
• 字数: 5146字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1673-8225.2005.07.028

摘要

目的:利用多西环素开放(Dox-on)可调控哺乳动物表达系统将AT2R基因引入体外培养的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMC),并经两次抗生素的筛选建立起了受四环素类似物多西环素(Doxycicline,Dox)紧密调控、表达血管紧张素Ⅱ2型受体(angiotensin Ⅱ subtype 2 receptors,AT2R)基因的双重稳定VSMC细胞系,在此基础上对细胞周期素激酶抑制蛋白-P21的表达受AngⅡ及其受体拮抗剂的影响进行研究.方法:通过常规分子生物学方法,建立Dox可调控表达AT2R基因的双重稳定大鼠VSMC细胞系.将该VSMC细胞系随机分为8组:①未转染对照组.②未转染+血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)组.③转染组.④转染+AngⅡ组.⑤转染+AngⅡ+Dox组.⑥转染+AngⅡ+Dox+CV-11974组.⑦转染+AngⅡ+Dox+PD123319组.⑧转染+AngⅡ+Dox+CV-11974+PD123319组.应用RT-PCR和免疫细胞化学染色技术,观察该双重稳定表达AT2R的VSMC细胞系中p21的mRNA及蛋白表达情况;采用AngⅡ及其1,2型其受体拮抗剂干预上述细胞,观测上述指标的变化.结果:加入Dox前转染组p21表达处于高水平,其mRNA及蛋白表达强度分别为118.363±19.225,0.196±0.013;AngⅡ1×10-7moL/L干预VSMC后p21mRNA及蛋白表达强度均显著降低,分别为51.761±4.429,0.032±0.014(t=13.10,10.41,P<0.01);在AngⅡ1×10-7moL/L干预的同时加入Dox后,p21呈现较强表达,其mRNA及蛋白表达强度明显高于转染+AngⅡ组(t=13.76,13 53,P<0.01);CV-11974可进一步增强p21的表达,其中p21mRNA及蛋白表达强度明显高于转染+AngⅡ组(t=9.81,34.90,P<0 01);PD123319干预组p21表达则处于低水平,与转染+AngⅡ组比较,差异无显著性意义(P>0.05).结论:AngⅡ干预降低VSMC中p21表达水平,这一作用是通过AT1R介导的;经Dox诱导表达AT2R基因可以明显抑制这一生物学作用,说明在这一生物学效应上,AT2R具有与AT1R相拮抗的生物学功能.AT2R基因经诱导后表达可以参与VSMC细胞周期进展的有效调控.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘建平	解放军第三军医大学西南医院心内科	23	106	6.0	10.0
2	何国祥	解放军第三军医大学西南医院心内科	5	32	2.0	5.0
3	景涛	解放军第三军医大学西南医院心内科	4	8	2.0	2.0
4	王海东	解放军第三军医大学西南医院胸心外科	3	3	1.0	1.0
5	冉擘力	解放军第三军医大学西南医院心内科	1	2	1.0	1.0
6	王耿	解放军第三军医大学西南医院心内科	1	2	1.0	1.0