不同免疫方案制备抗HAb18G/CD147胞外区多克隆抗血清的比较

• 作者: 张思河 杨向民 邢金良 陈志南
• 来源期刊: 细胞与分子免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: HAb18G/CD147 免疫方案 DNA-cell booster 抗体滴度 Ig亚类
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 抗体工程
• 页码范围: 65-68
• 页数: 4页
• 分类号: R392-33
• 字数: 3177字
• 语种: 中文

摘要

目的: 制备针对肝癌相关抗原HAb18G/CD147胞外区不同表位的抗血清, 比较不同免疫方案的免疫效果.方法: 以原核表达的GST-HAb18GEF融合蛋白、重组真核表达质粒pcDNA3/HAb18G及HCC细胞为免疫原, 分别采用蛋白常规免疫、 DNA肌肉免疫及pcDNA3/HAb18G-HCC booster(DNA-cell booster)免疫接种BALB/c小鼠.采用间接ELISA和细胞ELISA, 同时测定免疫血清中抗变性和天然HAb18GEF IgG抗体的滴度和Ig亚类.用Western blot检测各免疫方案制备的抗血清, 与变性HAb18GEF抗原结合的特异性.用免疫荧光法验证DNA-cell booster免疫接种法制备的抗血清, 与细胞膜上天然HAb18G抗原的结合特异性.结果: 以GST-HAb18GEF常规免疫后, 可诱导高滴度的IgG1抗体产生, 但针对的多为HAb18GEF的变性或线性表位; 以pcDNA3/HAb18G肌肉免疫后, 可诱导针对其天然表位的IgG2a抗体产生, 但滴度较低; 以DNA-cell booster免疫后, 可诱导中等滴度、针对其天然表位的IgG2a和IgG1抗体产生.结论: 不同免疫方案可诱导针对HAb18GEF不同表位、不同滴度的多克隆抗血清, 为淘筛针对其不同表位的多样性抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈志南	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	114	603	12.0	18.0
2	邢金良	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	35	135	8.0	9.0
3	张思河	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	23	106	6.0	9.0
4	杨向民	第四军医大学基础部细胞工程研究中心	25	102	6.0	8.0