人内皮抑素在毕赤酵母中的组成型表达及其活性检测

• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组人内皮抑素 毕赤酵母 组成型表达
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 294-297,307
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3470字
• 语种: 中文

摘要

为获得大量具有生物学活性的重组人内皮抑素(Endostatin),在毕赤酵母中进行组成型表达的研究.将由毕赤酵母偏爱密码子组成的Endostatin cDNA插入组成型载体pGAPZαA中,构建表达载体pGAPZαA-ENDO,并转化到毕赤酵母X-33中.重组菌株在甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAP)启动子的调控作用下,进行组成型表达Endostatin蛋白.重组人Endostatin产量达到102mg/L.Western blot显示:表达蛋白能与兔抗Endostatin的多克隆抗体特异性结合.纯化后的重组Endostatin具有抑制人血管内皮细胞系ECV-304细胞增殖的活性.利用毕赤酵母组成型表达系统能获得大量具有生物活性的Endostatin蛋白.