质粒介导的RNA干扰对AD293细胞中HBcAg表达的抑制作用

• 作者: 侯晓丽 吴炜 姚航平 徐宁 朱海红 羊正纲
• 来源期刊: 浙江大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 肝炎核心抗原,乙型/分析 基因疗法 RNA/遗传学 基因表达调控 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 专题报道
• 页码范围: 104-109
• 页数: 6页
• 分类号: R512.62
• 字数: 4711字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3785/j.issn.1008-9292.2005.02.003

摘要

目的:研究质粒介导的RNA干扰效应对HBcAg基因表达的抑制作用.方法:设计并构建针对HBcAg基因的小发夹RNA表达载体,将构建好的shRNA表达载体和HBcAg-增强型绿荧光蛋白融合蛋白表达载体共转染人胚肾细胞株AD293,以空载体组以及针对无关序列的shRNA表达载体组为阴性对照,流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测RNAi的抑制效果.结果:构建的特异性shRNA表达载体可以抑制HBcAg基因在AD293细胞中的表达,流式细胞仪检测抑制率可达76%,实时荧光定量PCR 法检测HBcAg基因的mRNA,抑制率可达58.6%.结论:质粒介导的RNAi可以有效抑制HBcAg基因的表达,为利用RNAi进行抗乙型肝炎病毒复制研究提供了一个可供选择的方法.