融合蛋白表达质粒pUL54S-EGFP的构建及在AD293细胞中的表达

• 作者: 尚世强 段群军 胡妙凤 陶然
• 来源期刊: 浙江医学
• 学科: 医学
• 关键词: 人巨细胞病毒 UL54基因 增强型绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 832-834,837
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3005字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-2785.2008.08.012

摘要

目的 探讨构建人巨细胞病毒(HCMV)截短UL54(UL54S)基因融合增强型绿色荧光蛋白(EGFP)表达质粒pUL54S-EGFP转染人胚肾293细胞,瞬时表达UL54S和EGFP的可行性.方法 采用PCR法扩增UL54s基因并将其克隆入真核表达载体pEGFP-N1中,采用脂质体法转染AD293细胞后通过荧光显微镜和流式细胞仪分析EGFP的表达情况.结果 重组质粒pUL54S-EGFP转染AD293细胞12h后即可见到荧光蛋白的表达,至48h表达达高峰;转染48h pUL54S-EGFP组平均转染率为47%.平均荧光强度为547.结论 重组质粒pUL54S-EGFP可在人胚肾293细胞内瞬时表达UL54S和EGFP融合蛋白,EGFP的表达可报告UL54基因的表达,质粒pUL54S-EGFP构建成功.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶然	浙江大学医学院中心实验室	79	405	11.0	19.0
2	尚世强	浙江大学医学院中心实验室	106	875	14.0	26.0
3	胡妙凤	浙江大学医学院附属儿童医院麻醉科	4	9	1.0	3.0
4	段群军	浙江大学医学院中心实验室	3	0	0.0	0.0