牛γ-干扰素在大肠杆菌与毕赤酵母中的表达及抗病毒活性比较

• 作者: 史喜菊 夏春 张灿 汪明 韩春来
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牛γ-干扰素 分子克隆 大肠杆菌 毕赤酵母 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 461-467
• 页数: 7页
• 分类号: S18
• 字数: 4197字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2005.04.011

摘要

用RT-PCR从经ConA刺激的荷斯坦奶牛外周血淋巴细胞总RNA中扩增了BoIFN-γ基因,克隆入pGEMT-easy载体测序.再亚克隆其成熟肽基因,分别构建大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET28a/BoIFN-γ和毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZα/BoIFN-γ.前者在E.coliBL21中经IPTG诱导实现了高效表达,表达蛋白占菌体总蛋白的30%,表达产物以包涵体形式存;后者在P.pastorisGS115中经甲醇诱导实现了高效分泌表达,表达产物直接分泌到培养上清中,表达量约为1.0 g/L.分别在CEF/VSV和MDBK/VSV细胞系上对2种表达蛋白的抗病毒活性进行了比较,结果表明,两种重组蛋白在MDBK/VSV抗病毒活性高于在CEF/VSV上的活性,而毕赤酵母表达的蛋白抗病毒活性高于大肠杆表达蛋白,约为前者的2倍.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪明	中国农业大学动物医学院	260	2264	23.0	31.0
2	夏春	中国农业大学动物医学院	68	1187	22.0	31.0
3	张灿	中国农业大学动物医学院	10	49	5.0	7.0
4	韩春来	中国农业大学动物医学院	16	131	6.0	11.0
5	史喜菊	中国农业大学动物医学院	12	160	8.0	12.0