犬α1干扰素在毕赤酵母中的分泌表达及其抗病毒活性研究

• 作者: 曹瑞兵 王艳 陈溥言 魏建超
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 犬α1干扰素 毕赤酵母 分泌表达 抗病毒活性
• 年，卷（期）: 2008,（4）
• 页码范围: 107-112
• 页数: 6页
• 分类号: Q511|Q786
• 字数: 5373字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-2030.2008.04.020

摘要

亚克隆犬α1干扰素(CaIFN-α1)成熟蛋白编码基因并克隆到表达载体pPICZα-A,构建转移重组载体pPICZα-A-CaIFN-α.pPICZα-A-CaIFN-α经Sac Ⅰ酶切线性化后电转化导入毕赤酵母菌株X-33.转化子经PCR分析鉴定后利用甘油增菌和甲醇诱导,实现了CaIFN-α1在毕赤酵母系统中的分泌表达.SDS-PAGE检测结果表明表达产物相对分子质量约为2.7×104,比其推导结果(约1.9×104)大,推测可能是发生了糖基化.酵母分泌表达的CaIFN-α1具有较高的抗病毒活性,约为1.45×106 U·mL-1,蛋白含量约为96 mg·L-1,比活性为1.49×107 U·mg-1.重组CaIFN-α1的生物学活性具有较强的种属特异性,在犬肾细胞(MDCK)上具有很高的抗病毒活性,在鸡胚成纤维细胞上活性较低,而在猫肾细胞(F81)和牛肾细胞(MDBK)上几乎没有抗病毒活性.进一步研究发现,重组犬α1干扰素对犬瘟热病毒和伪狂犬病毒在犬肾细胞中的增殖具有显著抑制作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	269	2875	28.0	40.0
2	曹瑞兵	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	71	897	19.0	28.0
3	王艳	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	27	496	10.0	22.0
4	魏建超	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	11	90	6.0	9.0