釉原蛋白基因启动子的克隆及在不同细胞中转录调控的分析

• 作者: 余擎 吴补领 孔辉 朱庆林 王铸钢 费俭 郭婷
• 来源期刊: 上海口腔医学
• 学科: 医学
• 关键词: 釉原蛋白 启动子 转录调控 报告基因 荧光素酶
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 402-406
• 页数: 5页
• 分类号: R781
• 字数: 3954字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-7248.2005.04.020

摘要

目的:克隆釉原蛋白基因启动子及可能影响转录调控的序列,分析其在不同细胞中的转录模式.方法:检索并分析釉原蛋白基因的上游调控序列.利用PCR及酶切方法,从小鼠C57BL/6J基因组上扩增不同长度(包括基本启动子区域)的转录调控序列,与PGL3-Basic载体的虫荧光素酶基因连接.瞬时转染CHO、Hela、UMR-106细胞,检测荧光素酶的活性,分析不同长度的启动子片段在各种细胞中的转录活性.结果:共构建了6个不同长度的报告载体,瞬转后发现在Hela细胞中有较强的荧光素酶活性,在CHO、UMR-106细胞中活性很弱.在不同的细胞内,启动子活性随片段长度变化,其变化趋势有明显的相似性.表现为在转录起始点上游975bp与532bp的区域具有较强的转录活性,而转录起始点上游285bp区域的转录活性有所降低.结论:釉原蛋白的启动子可在Hela细胞中激活,Hela细胞可作为研究釉原蛋白启动子转录调控的细胞模型;初步判断釉原蛋白启动子上的-1693与-975之间的序列为转录抑制区域,-532与-285之间为转录增强区域.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	余擎	解放军第四军医大学口腔医学院	4	4	1.0	2.0
2	费俭	中国科学院上海分院细胞生物学研究所	47	253	9.0	14.0
4	吴补领	解放军第四军医大学口腔医学院	8	17	3.0	3.0
7	孔辉		3	23	2.0	3.0
8	郭婷	解放军第四军医大学口腔医学院	3	14	1.0	3.0
9	朱庆林	解放军第四军医大学口腔医学院	1	1	1.0	1.0