PKCθ-EGFP融合蛋白在HeLa细胞中的表达及其对细胞形态的影响

• 作者: 何贤辉 徐丽慧 杜丽蕊
• 来源期刊: 暨南大学学报（自然科学与医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白激酶Cθ 绿色荧光蛋白 融合蛋白 小檗碱 细胞转染
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 470-474
• 页数: 5页
• 分类号: R392.12
• 字数: 3103字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-9965.2005.04.004

摘要

目的:分析增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与蛋白激酶C-θ (PKCθ)的融合蛋白(PKCθ-EGFP)在HeLa细胞中的表达、亚细胞定位及其对细胞形态的影响.方法:用脂质转染胺(LipofectAMINE 2000)为载体分别以pPKCθ-EGFP和pEGFP-N1转染HeLa细胞,流式细胞仪分析其表达率,激光共聚焦显微镜分析其亚细胞定位,同时分析二丁酸佛波醇酯(PDB)和小檗碱对其亚细胞定位和细胞形态的影响.结果:转染pEGFP-N1或pPKCθ-EGFP的HeLa细胞48 h后,表达绿色荧光的细胞百分率分别为(70.9±4.4)%和(45.8±2.3)% (P<0.05).表达的PKCθ-EGFP融合蛋白均匀分布于细胞内,与EGFP蛋白在细胞内的分布相似.PDB刺激30 min后,表达PKCθ-EGFP的HeLa细胞的形态发生显著变化,即由原来的梭形变成圆形,荧光强度增强.但表达EGFP的HeLa细胞的形态及荧光分布均不受影响.小檗碱对PDB诱导的HeLa细胞的形态和EGFP-PKCθ融合蛋白的分布无明显影响.结论:表达PKCθ-EGFP融合蛋白的HeLa细胞在PDB作用下细胞形态发生显著变化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐丽慧	暨南大学生物工程研究所	69	509	13.0	20.0
2	何贤辉	暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室	98	770	16.0	23.0
3	杜丽蕊	暨南大学组织移植与免疫教育部重点实验室	4	48	3.0	4.0