异基因造血干细胞移植后人巨细胞病毒感染临床毒株UL54基因的克隆及序列分析

• 作者: 何华坤 叶铁真 周天鸿 张纯青 李月琴 王波 田传军 苏运贞
• 来源期刊: 临床内科杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 异基因造血干细胞移植 人巨细胞病毒 UL54 克隆 序列分析
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 248-251
• 页数: 4页
• 分类号: R733.71
• 字数: 3600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-9057.2005.04.012

摘要

目的研究异基因造血干细胞移植(Allo HSCT)后感染人巨细胞病毒(HCMV)临床病毒株UL54基因的克隆与鉴定.方法从异基因造血干细胞移植后感染HCMV的患者体内分离出HCMV临床毒株,根据GenBank提供的实验室标准病毒株HCMV AD169 UL54基因DNA全序列及有关文献,从该临床毒株DNA中扩增分离出UL54基因片段,并克隆入pEGM3Z载体.对重组体pEGM3Z-UL54进行测序鉴定,并进行初步的序列分析.结果从临床病毒株中扩增出约3728bp的片段,克隆产物经琼脂糖凝胶电泳及直接测序鉴定,证实为HCMV UL54基因,其序列保守区域与GenBank报道AD169基本一致,但在第519、618、723、910、1188、1641、2070、2278、2279、2442、3140等11个位点发生碱基突变,涉及到编码氨基酸C304R、T760N、Y1047C、R1054K等位点发生改变,其中T760N为UL54保守区域改变. 结论成功克隆出Allo HSCT后感染野生型人巨细胞病毒的UL54基因,初步的序列分析证实其存在11个碱基发生突变,并导致编码产物4个氨基酸位点发生改变.