C型产气荚膜梭菌α毒素基因的克隆与表达

• 作者: 刘哲 王仁军 许崇利 许崇波 陈永燕
• 来源期刊: 微生物学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: C型产气荚膜梭菌 α毒素基因 基因克隆 基因表达
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 62-66
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 2184字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0253-2654.2005.01.013

摘要

利用PCR技术,从C型产气荚膜梭菌染色体基因组中扩增了1.2kb的α毒素基因,将纯化的PCR产物与载体pGEM-T连接,转化至受体菌JM109中,经NcoI/EcoRI和BamHI/EcoRI酶切鉴定及核苷酸序列测定证实,重组质粒pXCPA1中含有α毒素全基因.随后用NcoI/EcoRI酶切质粒pXCPA1,回收α毒素基因片段,插入到事先经同样酶切处理的载体pET-28c中相应酶切位点,构建了表达质粒pETXA1,经NcoI/EcoRI和BamHI/EcoRI酶切鉴定及核苷酸序列测定证实,表达质粒含有α毒素基因且基因序列和阅读框架正确.重组菌株BL21(DE3)(pETXA1)表达产物经ELISA检测和SDS-PAGE分析,重组菌株表达的α毒素蛋白能够被α毒素单抗识别,其表达量占菌体总蛋白相对含量的16.28%.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许崇波	大连大学生物工程学院	70	565	12.0	20.0
2	许崇利	宁夏大学生命科学学院	8	77	5.0	8.0
3	刘哲	大连大学生物工程学院	4	20	3.0	4.0
4	王仁军	大连大学生物工程学院	21	105	6.0	10.0
5	陈永燕	大连大学生物工程学院	6	116	4.0	6.0