整合素β3亚基不同片段在酵母双杂交系统中的表达及对报告基因激活作用的检测

• 作者: 姚佳 杨建波 杨洁
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 整合素αⅡbβ3 酵母双杂交 转录激活
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 584-589
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 3768字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2005.06.024

摘要

目的:为建立用于筛选人血小板整合素蛋白αⅡbβ3拮抗剂的高通量药物筛选模型,对其β3亚基不同片段在酵母双杂交系统中的表达及对报告基因的激活作用进行初步研究.方法:通过PCR扩增得到6个不同长度的整合素β3亚基基因片段,包括片段A1(55E-199Q)、A2(235K-385S)、A3(4I-454T)、A4(4I-77S)、A5(4I-147S)和A6(4I-284S),分别克隆到酵母双杂交诱饵载体pAS2-1中,然后将重组质粒导入酵母双杂交菌株Y190中,检测其表达产物在酵母细胞中对报告基因的激活作用.结果:6个片段对酵母均无毒性作用,片段A1、A2、A3、A5、A6不能激活报告基因HIS3和LacZ的表达,而片段A4和一个A3的缺失突变体可以激活报告基因的表达,β3亚基N末端存在一个转录激活区.结论:在建立模型时可以使用A1、A2、A3片段,但转录激活是否是β3亚基的生理功能仍有待进一步研究确证.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨洁	南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室	60	325	9.0	16.0
2	姚佳	南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室	3	21	2.0	3.0
3	杨建波	南京大学生命科学学院医药生物技术国家重点实验室	3	21	2.0	3.0