AD7c-NTP与麦芽糖结合蛋白的融合表达、纯化及其抗血清制备

• 作者: 刑伟 吴光耀 李荣贵 汪靖超 王帅 赵仁亮
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 麦芽糖结合蛋白AD7c-NTP融合蛋白 表达 纯化 抗血清
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 214-218
• 页数: 5页
• 分类号: Q51
• 字数: 2861字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2005.04.002

摘要

人工合成了编码AD7c-NTP的基因,并将其中的6种密码子GGA AGG AGA ATA CTA CCC分别突变成大肠杆菌偏爱密码子GGT CGT CGT ATC CTG CCG,PCR扩增后克隆到表达载体pMAL-c2上,构建表达质粒pMAL-AD7c,重组质粒导入E.coli BL21(DE3)构建工程菌,IPTG诱导实现了MBP-AD7c-NTP融合蛋白在工程菌中的高效表达,细胞裂解液经Amylose-resin亲和层析、DEAE-Sepharose离子交换层析以及Su-perdex 200凝胶过滤层析,得到了电泳纯的融合蛋白.纯化的融合蛋白免疫家兔制备了兔抗MBP-AD7c-NTP融合蛋白的抗血清,利用该抗血清及点杂交技术,初步分析了10例AD疑似患者的尿样,结果表明5例疑似患者的尿样呈阳性,另5例呈阴性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李荣贵	青岛大学生物系	68	702	13.0	25.0
2	吴光耀	北京大学生命科学学院	62	89	5.0	8.0
3	赵仁亮		116	626	13.0	18.0
4	王帅	青岛大学生物系	10	35	4.0	5.0
5	汪靖超	青岛大学生物系	19	260	7.0	16.0
6	刑伟	青岛大学生物系	1	5	1.0	1.0