猪瘟病毒E2基因与报告基因lacZ双表达质粒的构建及体外表达

• 作者: 冯霞 刘在新 刘湘涛 孙世琪 尚佑军 尹双辉 谢庆阁
• 来源期刊: 中国兽医科技
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 E2基因 lacZ基因 真核双表达质粒 BHK21细胞
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 微生物学
• 页码范围: 363-367
• 页数: 5页
• 分类号: S852.659.6
• 字数: 3885字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4696.2005.05.008

摘要

利用反转录和套式PCR技术,从猪瘟病毒(CSFV)石门血毒中扩增出了E2基因,将其用NotⅠ和XhoⅠ双酶切后,与同样处理的真核表达载体pBudCE4.1相连,获得了pBudCE Es2-22的阳性质粒.对后者再以HindⅢ和XbaⅠ双酶切,并与来自质粒pBudCE lacZ/CAT的lacZ基因片段连接,获得了含CSFV E2基因与lacZ报告基因的真核双表达质粒pBudCE lacZ/Es2-22.该质粒转染BHK21细胞后,用β-Gal Staining试剂盒原位染色可见许多着染蓝色的细胞;用CSFV Antigen试剂盒检测转染细胞的上清液和细胞沉淀,均可检测到含CSFV E2抗原.结果表明,构建的真核质粒pBudCE lacZ/Es2-22实现了2个外源基因的共表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘湘涛	中国农业科学院兰州兽医研究所	86	606	14.0	22.0
2	尚佑军	中国农业科学院兰州兽医研究所	37	117	6.0	10.0
3	尹双辉	中国农业科学院兰州兽医研究所	12	113	3.0	10.0
4	谢庆阁	中国农业科学院兰州兽医研究所	62	755	16.0	24.0
5	孙世琪	中国农业科学院兰州兽医研究所	13	50	4.0	7.0
6	刘在新	中国农业科学院兰州兽医研究所	47	488	11.0	21.0
7	冯霞	中国农业科学院兰州兽医研究所	12	91	3.0	9.0