金属螯合亲和层析纯化和复性重组人铜锌超氧化物歧化酶

• 作者: 刘建国 刘建荣 赵晓瑜 顾雅君
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 金属螯合亲和层析 复性 重组人铜锌超氧化物歧化酶(rhCu,Zn-SOD) 包含体
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 993-997
• 页数: 5页
• 分类号: Q55
• 字数: 6294字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.06.025

摘要

将重组人铜锌超氧化物歧化酶(rhCu,Zn-SOD)包含体(经纯化后纯度达80%以上)以稀释法或透析法初步复性后,分别再经金属螯合亲和层析(MCAC)纯化.结果透析复性样品和稀释复性样品经MCAC纯化后的rhSOD比活是各自上柱前样品比活的2.2倍和5.3倍,蛋白回收率分别为64%和25%,同时两者活性回收率皆大于130%.表明目标蛋白rhSOD在经过MCAC纯化的同时又获得进一步复性.SDS-PAGE显示rhSOD为19kD的单一条带,纯度大于95%,比活达到5000u/mg左右,同时NBT生物活性染色鉴定显示出很强的超氧化物歧化酶活性.表明MCAC对于复性不完全的rhCu,Zn-SOD而言是一种纯化和使其进一步复性的简便省时且有效的方法.该方法为以包含体形式表达的基因重组蛋白的纯化和复性提供了新思路.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵晓瑜	河北大学生命科学学院	83	757	15.0	23.0
2	刘建国	河北大学生命科学学院	9	18	2.0	4.0
3	刘建荣	河北大学生命科学学院	30	163	6.0	12.0
4	顾雅君	河北大学生命科学学院	17	98	4.0	9.0