抗松材线虫纤维素酶单链抗体库的构建及筛选

• 作者: 张奇 杨文博 田旺 白钢
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 松材线虫 纤维素酶 单链抗体 噬菌体抗体库 筛选
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 900-905
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 5466字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.06.008

摘要

构建鼠源性松材线虫纤维素酶(Bursaphelenchus xylophilus cellulase,BXC)的噬菌体单链抗体库,从中筛选特异性BXC的单链抗体.以BXC为抗原免疫BALB/C小鼠,从脾脏提取总RNA,用RT-PCR技术扩增小鼠抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因.经重叠PCR(SOE PCR)在体外将VH和VL连接成单链抗体(scFv)基因,并克隆到噬菌粒载体pCANTAB5E中,电转化至大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体超感染,成功构建了库容为5×104的Anti-BXC单链抗体库,并从该抗体库中初步筛选到了特异性识别BXC的噬菌体单链抗体scFv.将表面展示单链抗体的单克隆噬菌体转化大肠杆菌HB2151进行可溶性表达,SDS-PAGE及Western blot分析结果显示,可溶性scFv获得表达,且与BXC具有结合活性,为松材线虫的检验检疫以及病理学研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	白钢	南开大学生命科学学院	88	954	18.0	26.0
2	杨文博	南开大学生命科学学院	46	529	13.0	20.0
3	张奇	南开大学生命科学学院	20	117	7.0	9.0
4	田旺	南开大学生命科学学院	4	50	4.0	4.0