用限制性酶切和Southern杂交对葡萄无核基因分子标记的分析

• 作者: 万怡震 张今今 张剑侠 杨克强 王西平 王跃进
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 葡萄 无核基因 限制性酶切分析 Southern杂交
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 294-298
• 页数: 5页
• 分类号: S6
• 字数: 2818字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2005.03.005

摘要

对葡萄(Vitis vinifera)无核基因特异标记39970524-5-564和39970524-6-1538的DNA序列进行了克隆和测序,其序列全长分别为564和1 538 bp,GenBank登录号为AY327513和AY327514.用Wingene231 DNA分析软件对39970524-5-564和39970524-6-1538序列的限制性内切酶酶切位点进行了分析,可识别6个碱基及其以上序列的酶切位点分别有30和131个;EcoRⅠ和HindⅢ在39970524-5-564特异标记上没有酶切位点,而EcoRⅠ在39970524-6-1538第135个碱基处有一个酶切位点,HindⅢ在39970524-6-1538上没有酶切位点.用39970524-5-564 DNA作探针对葡萄基因组DNA作Southem杂交,结果在无核亲本红光无核及无核基因供给者无核白和无核杂种上出现杂交带,而且呈单拷贝,而在有核亲本红地球及有核杂种上未出现杂交带,进一步证明了39970524-5-564特异片段来源于无核葡萄基因组,为检测和克隆葡萄无核基因提供了证据.