抗旋毛虫肌幼虫ES抗原单克隆抗体的制备与鉴定

• 作者: 安桂珍 王妍
• 来源期刊: 中国寄生虫病防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 旋毛虫 肌幼虫 排泄分泌抗原 杂交瘤细胞 单克隆抗体
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 255-258
• 页数: 4页
• 分类号: R383.15
• 字数: 4345字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5234.2005.04.005

摘要

目的制备分泌抗旋毛虫肌幼虫排泄分泌(ES)抗原单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞株,并对其及分泌的McAb进行鉴定. 方法用旋毛虫肌幼虫ES抗原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选分泌特异性、高滴度McAb的杂交瘤细胞株,制备腹水,进行纯化.ELISA间接法、夹心法和竞争法分别测定McAb滴度、相对亲和力和相加效应,琼脂双扩散试验鉴定免疫球蛋白类型,检测McAb与其他寄生虫抗原的交叉反应.电镜观察杂交瘤细胞超微结构,计数染色体数目及观察杂交瘤细胞分泌McAb的稳定性. 结果筛选出2株(B2C12和E11F11)分泌抗旋毛虫肌幼虫ES抗原McAb杂交瘤细胞株.电镜显示,杂交瘤细胞具有肿瘤细胞和浆细胞的特征,胞浆内可见大量分泌颗粒;杂交瘤细胞染色体数目平均为98.6条,均能稳定分泌McAb(属IgM).B2C12株培养上清液和腹水McAb滴度分别为1∶1 280和1∶2.048×104,E11F11株为1∶640和1∶1.024×104,其中前者的相对亲和力较后者稍高.2株McAb识别ES抗原不同的抗原决定簇;且不与其他寄生虫抗原发生交叉反应. 结论获得2株抗旋毛虫肌幼虫ES抗原杂交瘤细胞株,均能稳定分泌高滴度、特异性的IgM类McAb,并识别不同的抗原决定簇,为研制旋毛虫病诊断试剂盒和制备基因工程抗体奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	安桂珍	天津医科大学寄生虫学教研室	15	64	4.0	8.0
2	王妍	天津医科大学寄生虫学教研室	2	6	1.0	2.0