副粘病毒F蛋白HR1和HR2在特异性膜融合中的作用

• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 副粘病毒 F蛋白 HR 特异性膜融合
• 年，卷（期）: 2005,（10）
• 所属期刊栏目: 病毒学
• 页码范围: 828-832
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4240字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2005.10.015

摘要

目的了解副粘病毒融合蛋白(F)分子上的七肽重复序列(HR1、HR2)在特异性膜融合中的作用.方法采用基因定点突变方法,在新城疫病毒(NDV)F与人副流感病毒(hPIV)F基因上创造相同的酶切位点.酶切后采用基因重组方法将F的HR1基因片段相互交换,得到交换HR1的两个嵌合体(chimera),即NDV C-HR1和hPIV C-HR1.用同样的方法又得到交换HR2的两个嵌合体,即NDV C-HR2和hPIV C-HR2.将各种嵌合体DNA与同源及异源HN DNA共转染BHK21细胞后,在真核细胞中表达.Giemsa染色和指示基因法检测细胞融合功能,荧光强度分析(FACS)检测F蛋白的表达效率.结果交换HR1后,NDV C-HR1的融合功能只有野毒株的53.91%,hPIV C-HR1的融合功能达到野毒株的83.15%;交换HR2后,NDV C-HR2的融合功能略高于野毒株,达到野毒株的107.23%,hPIV C-HR2的融合功能却只有野毒株的12.01%.FACS分析表明,交换HR1后的NDV C-HR1和hPIVC-HR1的表达效率均下降.交换HR2后,NDV C-HR2的表达效率没有改变,而hPIV C-HR2的表达效率下降.结论 NDV F的HR1对其特异性膜融合具有重要作用,而HR2则没有病毒特异性;hPIV F的HR1和HR2对hPIV的特异性膜融合都有重要作用.