Lentivirus介导表达多基因的人胚基因工程神经干细胞的实验研究

• 作者: BLITS B OUDEGA M 周田华 徐林 林月秋 汤逊 蔡培强 阳运康
• 来源期刊: 中国脊柱脊髓杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Lentivirus 人胚神经干细胞 基因工程 神经营养因子-3 绿色荧光蛋白
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 脊柱脊髓损伤
• 页码范围: 288-291
• 页数: 6页
• 分类号: R318.5
• 字数: 4656字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-406X.2005.05.007

摘要

目的:探索以Lentivirus为载体,构建同时携带并表达多基因的基因工程人胚神经干细胞(human neural stem cell,hNSC)的可行性,为脊髓损伤治疗的研究提供材料.方法:培养和鉴定hNSC;用携带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)和神经营养因子-3(neurotrophic factor-3,NT-3)的Lentivirus转染hNSC;用荧光显微镜观察、鼠胚背根神经结培养(dorsal root ganglion,DRG)和Slot blot等方法检测基因工程hNSC的多基因表达情况.结果:培养获得了大量的hNSC;荧光显微镜观察到几乎100%的hNSC表达GFP;基因工程hNSC的培养液能促使大鼠DRG旺盛生长;Slot blot检测到基因工程hNSC能高效分泌NT-3蛋白.结论:以Lentivirus为载体能构建同时携带并稳定表达多基因的基因工程hNSC,为脊髓损伤治疗的基础研究及进一步临床应用提供了有价值的细胞资源.