HPV6型E6与结核杆菌HSP70融合基因的构建及原核表达

• 作者: 党育平 刘玉峰 孙林朝 沈柱 王刚 范雪莉
• 来源期刊: 中国皮肤性病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结核杆菌 热休克蛋白70 人乳头瘤病毒6型 融合基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2005,（12）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 705-707
• 页数: 3页
• 分类号: R329.12|R34
• 字数: 2993字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1001-7089.2005.12.001

摘要

目的构建HPV6型E6抗原与结核杆菌HSP70的融合基因,在大肠杆菌中进行表达和纯化.方法利用PCR方法扩增结核杆菌HSP70基因,插入原核表达载体pGEX-4T-1;经测序正确后,再通过PCR方法扩增HPV6型E6基因片段,测序后插入HSP70基因的5'端,构建HPV6E6与结核杆菌HSP70的N端融合基因原核表达质粒pGEX-E6-HSP70;在含有该质粒的大肠杆菌DH5α,进行诱导表达和分离纯化.结果成功地构建了pGEX-E6-HSP70原核表达质粒,诱导表达产物与抗GST抗体在113 kD处有很强的交叉反应;大肠杆菌超声破碎后的上清液用SDS-PAGE检测到表达的蛋白多为可溶性融合蛋白;经GST融合蛋白表达系统纯化,得到了E6与结核杆菌HSP70的可溶性融合蛋白.结论成功获得HPV6型E6与结核杆菌HSP70的融合蛋白,为研究HPV6型E6与结核杆菌HSP70融合蛋白疫苗在尖锐湿疣治疗中的作用提供了材料.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘玉峰	第四军医大学西京医院皮肤性病科	278	1616	19.0	26.0
2	王刚	第四军医大学西京医院皮肤性病科	228	823	15.0	19.0
3	沈柱	第四军医大学西京医院皮肤性病科	49	214	9.0	11.0
4	范雪莉	第四军医大学西京医院皮肤性病科	12	56	4.0	7.0
5	党育平	第四军医大学西京医院皮肤性病科	18	91	5.0	9.0
6	孙林朝	第四军医大学西京医院皮肤性病科	1	2	1.0	1.0