SARS冠状病毒spike基因DNA疫苗的初步研究

• 作者: 余杏娟 冯启胜 冯炳健 刘鹏 张如华 张经纬 曾益新 李疆 潘志刚 覃海德 陈丽珍 黄丽惜
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SARS病毒 spike基因 DNA疫苗
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 疫苗学
• 页码范围: 297-301
• 页数: 5页
• 分类号: R3
• 字数: 4322字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2005.04.013

摘要

目的构建SARS病毒spike基因片段真核表达质粒DNA疫苗;检测spike基因片段的免疫原性;筛选SARS病毒疫苗构建的理想靶抗原. 方法采用RT-PCR从SARS冠状病毒北京01(BJ01)株cDNA获取了spike基因cDNA的全长D12、编码N末端氨基酸的cDNA片段D14和编码C末端氨基酸的cDNA片段D23;构建重组真核表达质粒pcDNA3/D12、pcDNA3/D14、pcDNA3/D23;用3种重组质粒和pcDNA3空质粒载体(对照)DNA皮下注射免疫Wistar大鼠;ELISA检测免疫后大鼠血清S蛋白特异性抗体IgG的产生;同位素51Cr实验检测特异性CTL应答;ELISPOT检测单细胞水平IFN-γ分泌. 结果 pcDNA3/D23疫苗免疫组大鼠血清有S蛋白阳性抗体IgG产生、抗体滴度>1000;脾淋巴细胞可诱导特异的CTL应答和IFN-γ分泌,pcDNA3/D23疫苗组与其它组之间统计分析P<0.05. 结论SARS冠状病毒S蛋白的C末端具有较强的免疫原性,是疫苗构建的理想候选靶抗原,本研究结果为SARS病毒的疫苗研究提供了资料.