人瘢痕疙瘩成纤维细胞Smad2特异siRNA的制备和活性鉴定

• 作者: 史毅 吴宏 林子豪 江华 汪滋民 袁湘斌 赵耀忠 金由辛 高中玉
• 来源期刊: 第二军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: RNA干扰 Smad2 瘢痕疙瘩 成纤维细胞
• 年，卷（期）: 2005,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 34-37
• 页数: 4页
• 分类号: R619.6
• 字数: 3403字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0258-879X.2005.01.012

摘要

目的:探讨应用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)特异性抑制人瘢痕疙瘩成纤维细胞内Smad2基因表达,筛选高效特异性siRNA.方法:根据siRNA设计原则,针对人Smad2基因序列特征设计Smad2 特异siRNA(1-3),转染瘢痕疙瘩成纤维细胞,RT-PCR检测siRNA对Smad2基因的抑制效果.结果:Smad2 siRNA-3可有效抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中Smad2基因的表达.随siRNA-3终浓度由50 nmol/L增加到100 nmol/L 及200 nmol/L,抑制效率逐渐增强(P<0.05);siRNA-3以终浓度200 nmol/L转染后24 h抑制效果最强,48 h逐渐减弱,但仍明显抑制(P<0.05).结论:应用RNA干扰技术可抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞中Smad2 基因的表达,其抑制作用具有明显的时间、浓度依赖性.