非涂渍毛细管无胶筛分电泳诊断Y染色体AZF区域微缺失

• 作者: 伊茂礼 何晓东 刘圣英 刘雨生 沈佐君 童先宏 郭通航
• 来源期刊: 中华检验医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 电泳 染色体 聚合酶链反应
• 年，卷（期）: 2005,（11）
• 所属期刊栏目: 基础实验诊断研究
• 页码范围: 1181-1184
• 页数: 4页
• 分类号: R44
• 字数: 3049字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:1009-9158.2005.11.023

摘要

目的建立一种快速毛细管电泳检测Y染色体AZF区域微缺失诊断男性不育症的方法. 方法利用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)作为筛分介质及其兼有的"动态"涂渍作用,采用毛细管非涂渍无胶筛分电泳与多重聚合酶链反应(PCR)相结合技术,配以高灵敏度的激光诱导荧光检测器,对Y染色体AZF(azoospermia factor)区域微缺失病人15个序列标签位点进行直接基因诊断.结果检测38例严重少精或无精症患者,发现10例存在缺失,缺失率为26.3%.对15例已婚有子女的正常人进行了对照检测,其中缺失率为0%,经χ2检验P<0.01,提示严重少精和无精与正常对照组的AZF区域微缺失率差异有统计学意义,明显高于正常对照组.同时,对AZF四个亚区STS微缺失率进行比较,分别将10例AZF微缺失群体中确定AZFc区的缺失率与另三个区域的缺失率进行分别统计分析,发现AZFc占63.4 %,AZFa占4.0 %,AZFb占15.2 %,AZFd 占17.4 %,χ2检验P<0.05,提示AZFc区的缺失率与另三个区域差异有统计学意义,AZFc区缺失率明显高于AZFa、AZFb及AZFd区.结论毛细管非涂渍无胶筛分电泳与传统的凝胶琼脂糖电泳相比,本方法在分离速度、分辨率及实验成本方面均有较大改善,其与多重PCR相结合使对严重少精和无精症的诊断更加准确、可靠.