拟南芥QRAP2基因的克隆、表达、DNA结合能力及体外转录活性分析

• 作者: 巩威 朱玉贤 雷娟 魏刚
• 来源期刊: 科学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: QRAP2 胁迫 DREB 酵母单杂交 转录因子
• 年，卷（期）: 2005,（17）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 1863-1868
• 页数: 6页
• 分类号: Q94
• 字数: 5138字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0023-074X.2005.17.012

摘要

通过对拟南芥ATH1基因芯片数据的分析, 从拟南芥中鉴定到一个受干旱胁迫高水平诱导的cDNA片段, 并用RACE方法获得了其全长cDNA. PCR及定量实时PCR分析表明, 该基因在经干旱、紫外线照射、脱落酸、高盐以及水杨酸等胁迫条件处理后表达量均有显著提高, 特别是干旱处理后短时间内表达量迅速提高, 3 h后即提高到对照样品的430多倍. 通过多序列比对和系统进化分析, 我们将该基因归于DREB亚家族. 由于该基因编码蛋白含有典型的AP2/EREBP DNA结合结构域, 并在N端有一段富含谷氨酰氨残基的区域, 所以将它命名为QRAP2 (Glutamine-rich AP2). 凝胶阻滞实验结果显示, QRAP2蛋白能够特异结合DRE顺式元件序列但不能与mDRE和GCC等非相关元件结合. 酵母单杂交实验表明, QRAP2蛋白全长序列或其N端112个氨基酸与GAL4 DNA结合结构域形成的融合蛋白表现出转录激活功能, 而其C端135个氨基酸与GAL4 DNA结合结构域的融合蛋白则没有表现出转录激活活性. 现有资料的分析表明, QRAP2是AP2/EREBP转录因子家族的新成员, 可能在干旱胁迫条件下参与激活相关下游基因的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	雷娟	北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	7	60	5.0	7.0
2	朱玉贤	北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	53	478	14.0	19.0
3	巩威	北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	3	57	3.0	3.0
4	魏刚	北京大学蛋白质工程及植物基因工程国家重点实验室	5	46	4.0	5.0