含人自噬基因hAPG12穿梭载体构建及其在酵母自噬中的作用

• 作者: 何才姑 朴英杰 秦建强 胡莲美 郑文岭
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 穿梭载体 自噬体 EGFP基因 hAPG12
• 年，卷（期）: 2005,（20）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 3061-3064
• 页数: 4页
• 分类号: Q784
• 字数: 2774字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2005.20.006

摘要

目的该研究旨在构建大肠杆菌-酿酒酵母穿梭载体pESC-URA-EGFP-hAPG12,将构建好的载体转化到酵母菌内,以此研究hAPG12在酵母自噬过程中的作用.方法从pEGFP-C2-hApG12中扩增出EGFP-hAPG12融合基因,鉴定正确后定向亚克隆到大肠杆菌-酿酒酵母穿梭载体pESC-URA中,构建载体pESC-URA-EGFP-hAPG12并将其转化到酵母,荧光显微镜下观察,用自噬诱导剂诱导酵母自噬以观察hAPG12在酵母内的表达定位.结果证实EGFP-hAPG12基因已完全正确亚克隆到pESC-URA中,荧光显栽微镜观察结果证明EGFP-hAPG12融合蛋白在酵母中成功表达,以诱导培养24 h的荧光最强,EGFP-hAPG12定位于酵母的自噬体中.结论成功构建了具有报告基因的重组真核表达载体pESC-URA-EGFP-hAPG12;EGFP-hAPG12融合蛋白在酵母中得到表达,hAPG12在酵母自噬体形成过程中起作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑文岭		200	1451	18.0	26.0
2	秦建强	第一军医大学组胚教研室	13	117	7.0	10.0
3	何才姑	第一军医大学组胚教研室	23	74	6.0	8.0
5	朴英杰	第一军医大学组胚教研室	77	730	14.0	22.0
8	胡莲美	第一军医大学组胚教研室	2	1	1.0	1.0