人自噬基因hAPG12的克隆及其重组真核表达载体的构建

• 作者: 何才姑 朴英杰 胡莲美 郑文岭
• 来源期刊: 陕西医学杂志
• 关键词: 基因 遗传载体 DNA,重组 @hAPG12
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论著·临床研究
• 页码范围: 387-389,411
• 页数: 5页
• 字数: 2967字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7377.2005.04.001

摘要

目的:探讨克隆人自噬基因hAPG12,构建重组真核表达载体pEGFP-C2-hAPG12,为进一步研究hAPG12的功能奠定基础.方法:从正常人外周血单个核细胞中提取总RNA,采用两步法RT-PCR,首先把RNA逆转录为cDNA,而后通过一对hAPG12的特异性引物扩增出目的基因,PCR产物与测序载体pUC18连接后转化到大肠杆菌DH5α,而后对单菌落进行菌落PCR、酶切和测序鉴定.将测序正确的hAPG12亚克隆入真核表达载体pEGFP-C2,该重组载体转化到大肠杆菌DH5α后进行菌落PCR和酶切鉴定.结果:测序结果表明从正常人外周血单个核细胞中所获得的hAPG12cDNAs含有225个碱基,与Genbank(BC011033)序列完全一致.构建的重组真核表达载体经鉴定证实hAPG12基因已完全正确亚克隆到pEGFP-C2.结论:成功克隆了人自噬基因hAPG12并构建了具有报告基因-增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组真核表达载体pEGFP-C2-hAPG12,为以后研究hAPG12的功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郑文岭	南方医科大学组胚教研室	121	603	11.0	20.0
2	朴英杰	南方医科大学组胚教研室	20	70	5.0	7.0
3	何才姑	南方医科大学组胚教研室	3	2	1.0	1.0
4	胡莲美	南方医科大学组胚教研室	4	6	1.0	2.0