pEGFP/hVEGF121融合蛋白真核表达载体的构建及在骨髓间质干细胞中的表达

• 作者: 张晓刚 张润峰 苏立 陈运贞
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 内皮生长因子 绿色荧光蛋白 融合蛋白质类 基因表达 骨髓 间质干细胞
• 年，卷（期）: 2005,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1681-1685
• 页数: 5页
• 分类号: R363
• 字数: 3277字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2005.09.004

摘要

目的:构建携带人血管内皮细胞生长因子121及绿色荧光蛋白报告基因的融合蛋白真核表达质粒并检测其在骨髓间质干细胞(MSC)中的表达. 方法:采用PCR技术,以pCD/hVEGF121质粒为模板扩增VEGF121基因全长,采用PCR产物的粘端克隆法,将VEGF121定向克隆入pEGFP-C1的多克隆位点,构建pEGFP/hVEGF121重组质粒,酶切、PCR及序列分析鉴定,脂质体介导转染体外培养的MSC,荧光显微镜及免疫细胞化学染色检测EGFP/VEGF融合蛋白的表达. 结果:PCR、酶切及测序证实目的基因VEGF121正确连接至pEGFP-C1的多克隆位点,pEGFP/hVEGF121重组质粒转染MSC后,荧光显微镜及免疫细胞化学检测EGFP/VEGF蛋白在MSC中存在表达. 结论:成功构建了携带人VEGF121及EGFP报告基因的融合蛋白真核表达质粒,并在MSC中获得表达,为进一步研究VEGF基因治疗缺血性心血管疾病及MSC的分化奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈运贞	重庆医科大学附属第一医院心内科	145	1225	16.0	28.0
2	张晓刚	重庆医科大学附属第一医院心内科	91	635	13.0	21.0
3	张润峰	重庆医科大学附属第一医院心内科	9	136	5.0	9.0
4	苏立	重庆医科大学附属第一医院心内科	50	329	8.0	17.0