大豆叶绿体转化载体pJY系列的构建及其在烟草上的转化研究

• 作者: 吴平 孙寰 寿惠霞 李金耀 赵丽梅 陈飒
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 叶绿体转化 表达载体 GFP
• 年，卷（期）: 2006,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 899-904,插2
• 页数: 7页
• 分类号: S188
• 字数: 5160字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2006.06.015

摘要

为解决杂交大豆(Glycine max)制种过程中不育系易与保持系混杂的问题,开展了大豆叶绿体转基因的研究.通过转基因方法在不育系的细胞质中植入筛选标记基因,以区分不育系和保持系.根据已发表的大豆叶绿体序列(GenBank X07675)设计引物,用PCR方法获得两段大豆叶绿体同源重组序列LHRR和RHRR,克隆到质粒pUC19中,并将来源于质粒pTF102的壮观霉素抗性基因aadA克隆到两段同源重组序列之间,以构建大豆叶绿体转化表达载体pJY01.aadA基因的启动子Prrn和终止子psbA基因3′序列,分别从烟草叶绿体基因组中扩增而来.在此基础上,将草丁膦抗性基因或绿色荧光蛋白与GUS的融合蛋白基因克隆到该载体上,得到pJY03与pJY04,并初步应用于烟草(Nicotiana tobacum)的叶绿体转化,获得了具壮观霉素抗性的绿色愈伤和幼苗,PCR扩增出aadA基因的条带,并在激光共聚焦扫描下检测到GFP的表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴平	浙江大学生命科学学院	58	2025	24.0	44.0
2	寿惠霞	浙江大学生命科学学院	14	136	7.0	11.0
3	李金耀	浙江大学生命科学学院	21	173	7.0	13.0
5	陈飒	浙江大学生命科学学院	2	10	2.0	2.0