戊型肝炎病毒结构蛋白基因的真核表达

• 作者: 杨连华 洪艳 王怡婷 经络 陈勇
• 来源期刊: 国际流行病学传染病学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 戊型肝炎病毒 嵌合基因 酵母表达系统 重组表达蛋白
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 19-22
• 页数: 4页
• 分类号: R5
• 字数: 3457字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4149.2006.01.005

摘要

目的使用酵母表达系统表达戊型肝炎病毒结构蛋白基因.方法构建含戊型肝炎病毒(HEV)结构蛋白嵌合基因HEV ORF23(由HEV ORF2 C端800bp片段与ORF3全基因组成)的重组表达质粒pPICZ α A-HEV ORF23,并通过电转移的方法将该基因整合入甲醇营养型酵母的基因组DNA中,利用甲醇进行诱导表达,表达产物经纯化后,进行Western印迹鉴定.结果pH6.0环境下诱导培养72h后,在细胞沉淀中获得一个分子量大约为69kDa的可溶性目的蛋白,纯化蛋白经Western印迹检测后发现能与戊型肝炎患者血清发生较强的特异性免疫反应.结论采用酵母表达系统诱导表达可以获得抗原性较强的HEV重组表达抗原,为进一步开发研制有效的诊断抗原和疫苗奠定了基础.