猪瘟病毒石门株E2基因4个抗原结构域的原核表达

• 作者: 宁宜宝 徐璐 王泰健 王琴 范学政 蒋春燕
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 E2基因 抗原结构域原核表达
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 814-818
• 页数: 5页
• 分类号: S8
• 字数: 3957字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2006.04.025

摘要

[目的]对猪瘟病毒石门株E2基因进行原核表达,以期获得可溶性表达产物,为检测猪瘟抗体的ELISA试剂盒的研制奠定基础.[方法]用PCR技术扩增了重组S21质粒载体上的猪瘟病毒石门株E2基因的4个主要抗原结构域ABCD,A1A2,B和C.分别将4个片段克隆于pMAL-p2X载体中,经PCR、双酶切和测序鉴定,E2基因的4个主要抗原结构域片段的位置、大小和读码框均正确.将4个片段分别转化到表达菌TB1、BL21、BL21-CodonPlus(DE3)-RP和BL21(DE3)中,共得到16株重组表达菌,用IPTG进行诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳和免疫印迹分析.[结果]E2基因的4个主要抗原结构域均可在这4种表达菌中表达,但以BL21-CodonPlus(DE3)-RP的表达效果最好,可表达出可溶性并且产量较高的目的蛋白.免疫印迹结果表明,表达的目的蛋白可以被猪瘟阳性血清和针对E2蛋白的单克隆抗体所识别.[结论]只表达目的基因的抗原结构域,可以缩短表达片段的长度,有利于获得可溶性目的蛋白,并且具有良好的血清学反应的特异性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王泰健		13	162	4.0	12.0
2	徐璐		24	169	8.0	11.0
3	范学政		43	501	11.0	21.0
4	王琴		59	698	14.0	23.0
5	蒋春燕		2	131	2.0	2.0
6	宁宜宝		119	1253	19.0	30.0