p73基因过量表达对人肺癌细胞A549凋亡及其化疗敏感性的作用

• 作者: 何勇 范士志 蒋耀光
• 来源期刊: 癌症
• 学科: 医学
• 关键词: p73基因 肺肿瘤 A549细胞 基因转移 化疗敏感性 凋亡
• 年，卷（期）: 2006,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 925-932
• 页数: 8页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-467X.2006.08.002

摘要

背景与目的:部分非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)表达野生型p53基因(wild-type p53,wt-p53),因此在基因治疗中克服这些NSCLC对wt-p53的抵抗机制就非常重要.P53基因家族的新成员p73是p53的同源体,本研究旨在探讨对wt-p53基因治疗抵抗的人肺腺癌细胞A549在外源p73基因转染或联用化疗药后凋亡程度和对化疗药物敏感性的变化.方法:将真核表达重组质粒pcDNA3-HA-p53或pcDNA3-HA-p73α转染入A549细胞,G418筛选,Western blot检测P53或P73α的表达.MTT法分析转染细胞对顺铂和阿霉素的敏感性,用流式细胞术、TUNEL法和DNA片段法分析化疗药作用下转染细胞的凋亡变化,克隆形成实验观察细胞生物学性状的改变.结果:转染p53或p73α基因的A549细胞可以稳定高表达p53或p73α蛋白.转染p73α的A549细胞在原本没有明显抑制和杀伤作用的药物浓度(6.25μmol/L的顺铂或0.25 μmol/L的阿霉素)作用下生长明显受到抑制,顺铂的IC50值从22.65 μmoL/L降至3.75μmol/L,阿霉素的IC50值从4.20 μmol/L降至0.06 μmol/L.p73能使A549细胞受顺铂和阿霉素诱导的细胞凋亡增加,而p53没有明显作用.流式细胞术显示p73α基因转染后,顺铂诱导的细胞凋亡率从10.6%升高到36.8%(P＜0.01),阿霉素诱导的细胞凋亡率从13.0%升高到41.1%(P＜0.01).克隆形成实验显示,p73α基因转染能明显降低顺铂和阿霉素作用后A549细胞的克隆形成数(P＜0.01),对顺铂和阿霉素的化疗增效倍数分别为2.0和2.4倍.结论:外源性p73基因的导入增加了wt-p53型A549细胞对顺铂和阿霉素等化疗药的敏感性,该作用可能与p73基因能不依赖于p53基因诱导细胞凋亡有关.p73基因可用于治疗wt-p53不能发挥作用的恶性肿瘤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋耀光	第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军胸外科中心	243	1835	20.0	31.0
2	范士志	第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军胸外科中心	103	500	12.0	17.0
3	何勇	第三军医大学大坪医院野战外科研究所全军胸外科中心	44	211	8.0	12.0