柳杉CAPS遗传标记反应体系的优化

• 作者: 杨萍 汤定钦 赵明水 郑前剑
• 来源期刊: 浙江农林大学学报
• 关键词: 植物学 柳杉 切割的扩增产物多态性序列(CAPS) DNA标记 反应体系 优化
• 年，卷（期）: 2006,（1）
• 页码范围: 52-55
• 页数: 4页
• 分类号: S718.43|Q523
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-0756.2006.01.010

摘要

建立柳杉Cryptomeria fortunei CAPS反应优化体系是进行柳杉遗传多样性研究的前提.通过对影响柳杉CAPS遗传标记反应体系结果主要因子的研究,确定了最佳的柳杉CAPS扩增反应体系:含有2.0 μL 10×Buffer,0.08 mmol·L-1dNTPs,200 mg·L-1铸型DNA,1.5 mmol·L-1MgCl2,0.1 μmol·L-1引物和41.675 nkat Taq DNA聚合酶的20 μL反应液.扩增程序是94 ℃预变性5 min,然后94 ℃变性40 s,58 ℃退火40 s,72 ℃延伸80 s,共35个循环,然后在72 ℃延伸5 min.PCR产物10.0 μL,加入2.0 μL 10×Buffer,83.350 nkat内切酶,7.5 μL双蒸水构成20 μL酶切反应体系.图5表1参8