瑞替普酶(reteplase)在海带中表达的鉴定分析

• 作者: 孙石静 孙雄华 廖建民 张新元 徐寒梅 沈子龙
• 来源期刊: 药物生物技术
• 学科: 生物学
• 关键词: 海带 瑞替普酶 鉴定
• 年，卷（期）: 2006,（4）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 265-270
• 页数: 6页
• 分类号: Q819
• 字数: 3373字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-8915.2006.04.006

摘要

为验证本实验室构建的瑞替普酶(reteplase,r-PA)基因是否成功转入海带,本文通过FAPA、PCR、Southern blotting和Western blotting等方法分别从体外纤溶活性、DNA的整合以及目的蛋白的表达等三个方面进行鉴定,并运用固定化金属离子亲和层析对表达的蛋白进行了初步分离纯化.FAPA结果表明转基因海带蛋白具有溶栓活性,PCR和Southern Blotting显示在1 100 bp处有特异性条带,Western blotting在39 ku处有蛋白条带,证明r-PA基因已成功转入海带而且获得稳定表达,海带中表达的r-PA不需复性就具有溶栓活性,同时说明在r-PA N端设计的(His)6有助于我们利用亲和层析分离纯化目的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈子龙	中国药科大学生物技术中心	86	688	11.0	23.0
2	徐寒梅	中国药科大学生物技术中心	77	186	7.0	11.0
3	孙石静	中国药科大学生物技术中心	5	26	4.0	5.0
4	廖建民	中国药科大学生物技术中心	27	390	7.0	19.0
5	孙雄华	中国药科大学生物技术中心	12	30	4.0	5.0
7	张新元	中国药科大学生物技术中心	7	44	5.0	6.0