瑞替普酶融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化及其复性

• 作者: 孙石静 孙雄华 廖建民 张新元 沈子龙
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 瑞替普酶 融合蛋白 诱导表达 优化 复性
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 363-367
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3144字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5048.2005.04.017

摘要

目的:为优化瑞替普酶(reteplase,r-PA)在大肠杆菌中的高效融合表达的条件,并提高其复性率.方法:通过改变诱导时间和温度、诱导剂浓度、培养基pH值及氨苄青霉素(Amp)浓度等条件,利用SDS-PAGE分析以上条件的改变对表达产物产量的影响.运用金属螯合层析对融合蛋白进行纯化和复性.结果与结论:LB培养基pH值为6,Amp浓度为100μg/mL,乳糖浓度为5 mmol/L的条件下39℃诱导4 h可获得高效表达的r-PA融合蛋白,其表达量占全菌蛋白的70%,其产物主要以包涵体形式存在.融合蛋白运用金属螯合层析一步纯化复性,其复性率可达10%,比活为55.7 U/μL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	沈子龙	中国药科大学生命科学与技术学院	86	688	11.0	23.0
2	孙石静	中国药科大学生命科学与技术学院	5	26	4.0	5.0
3	廖建民	中国药科大学生命科学与技术学院	27	390	7.0	19.0
4	张新元	中国药科大学生命科学与技术学院	7	44	5.0	6.0
5	孙雄华	中国药科大学生命科学与技术学院	4	19	3.0	4.0