重组质粒pUC-CK在大肠杆菌中表达条件的优化

• 作者: 曹西南 王芳
• 来源期刊: 昆明医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: PKC 重组蛋白表达 大肠杆菌E.coli
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 10-13
• 页数: 4页
• 分类号: R34
• 字数: 2727字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4706.2004.04.003

摘要

目的:优化含PKCε催化功能域基因的重组质粒pUC-CK在大肠杆菌中表达的最佳条件.方法:含重组质粒大肠杆菌培养、表达产物的SDS-PAGE电泳及Western blot检测.结果:PKCε催化功能域在大肠杆菌中表达的最佳条件为:含重组质粒大肠杆菌过夜培养时加入0.1%的葡萄糖增加质粒拷贝数;诱导剂(IPTG)的最适工作浓度为0.5 mmol/L;诱导最适培养温度为30℃;诱导培养时间为2～3 h用于检测,6～24 h用于分离纯化.结论:PKCε催化功能域在大肠杆菌中成功表达,为今后大量表达、纯化该酶蛋白作了前期铺垫.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王芳	昆明医学院生物化学教研室	53	317	8.0	15.0
2	曹西南	昆明医学院分子生物学实验室	21	90	6.0	8.0