重组人谷氧还蛋白1在大肠杆菌中表达条件的优化、纯化及活性检测

• 作者: 刘莹莹 吴莉芳 周宏博 房绍红 邹朝霞
• 来源期刊: 生命科学研究
• 学科: 生物学
• 关键词: pRSETA-Grx1 表达条件优化 纯化
• 年，卷（期）: 2006,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 228-232
• 页数: 5页
• 分类号: Q782
• 字数: 4210字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7847.2006.03.008

摘要

为进一步研究谷氧还蛋白1(Grx1)的生物学功能及作用机制,将已构建的pRSETA-Grx1融合蛋白表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中表达,并优化表达条件,用SDS-PAGE和凝胶影像分析.结果表明,当菌体密度OD600为1.0时开始诱导,加入终浓度0.5 mmol/L IPTG,37℃,110±5 r/min振荡培养5 h,重组蛋白为可溶性,表达量达30%以上.用Ni-NTA树脂亲和层析纯化重组蛋白,获得蛋白质纯度达90%以上;Western印迹结果表明,该蛋白具有免疫活性;MTT结果显示,终浓度为10 mg/L Grx1重组蛋白具有保护细胞抵御500μmol/L H2O2作用(P＜0.01).

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周宏博	哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室	40	242	9.0	13.0
2	刘莹莹	哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室	5	23	3.0	4.0
3	房绍红	哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室	10	26	2.0	4.0
4	邹朝霞	哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室	16	89	7.0	9.0
5	吴莉芳	哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室	2	7	2.0	2.0